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區帶電泳

是在支持物上，在電場作用下，在均一的緩沖液體系，樣品中帶正或負電荷的離子分別向負或正極以不同速度移動，分離成一個個彼此隔開的區帶。這是當前應用電泳技術。區帶電泳按支持物的物理性狀不同，又可分為紙和其他纖維膜電泳、淀粉電泳、凝膠電泳。

等電點聚焦電泳

凝膠中加入兩性電解質，在電場強度下形成PH梯度。樣品在電泳中，環境PH大于其PI時帶負電荷，向正極移動，環境的PH小于其PI時帶正電荷，向負極移動，當泳動到其自身特有的等電點時，其凈電荷為0，泳動速度下降到0，具有不同等電點的物質聚在各自等電點位置，形成一個個清晰的區帶，分辨率較高。

電泳技術方法

 

電泳種類很多，電泳的原理基本相同，但不同的支持物或凝膠又有各自的特點。

1 紙電泳

2 薄層電泳

3 薄膜電泳

4 瓊脂糖凝膠電泳



6 毛細管電泳

薄膜電泳

以醋酸纖維制成的薄膜作為支撐體的電泳稱為薄膜電泳。  將之溶于等有機溶劑中，即可涂布成均一細密的微孔薄膜， 厚度約以0.1-0.15mm為宜。 醋酸纖維素薄膜與濾紙相比較，有以下優點：

1.分離效果好。對蛋白質樣品吸附極少，無拖尾現象，染色后背景能完全脫色，各種蛋白質染色帶分離清晰，因而提高了定量測定的精 確性。

2.省時。由于親水性較濾紙小，電滲作用小，電泳時大部分電流是由樣品傳導的，所以分離速度快，電泳時間短，一般電泳45-60min即可，加上染色、脫色，整個電泳完成僅需90min左右。

3.靈敏度高，樣品用量少。血清蛋白電泳僅需2μL血清，故常用于檢測微量異常蛋白的改變。

4.應用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離，如胎兒甲種球蛋白、溶菌酶、組蛋 白等用纖維素薄膜電泳能較好地分離。

5.易保存，易定量。纖維素薄膜電泳染色后，經冰乙酸、混合液或其他溶液浸泡 后可制成透明的干板，有利于掃描定量及長期保存。

由于纖維素薄膜電泳操作簡單、價廉。目前已廣泛用于分析檢測血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、酶、多肽及其他生物大分子。


薄膜電泳

1．儀器： 中低壓電源、 DYCP-38C電泳槽 、WD-9404型加樣器

2．試劑：

（2）染色液：麗春紅S ，；

（3）漂洗液：95%乙醇，冰醋酸 ；

（4）透明液：無水乙醇，冰醋酸。

3、介質：纖維素薄膜，7×9cm等

纖維素薄膜電泳注意事項:

1.粗糙面點樣. 1-2μl為宜

2.恒流電泳:電流強度0.4～0.6mA/cm

3.pH8.6 緩沖液（離子強度0.06）

4.染色5min即可

5.固定保存：將干燥的電泳圖譜膜條放入透明液中浸泡10–15分鐘后，取出貼于潔凈玻璃板上，干燥后，即為透明薄膜圖譜。